2、 實驗

2.1、材料

2.1.1、表面活性劑和洗滌劑

本研究使用了七種表面活性劑和三種商用洗滌劑。 這七種表面活性劑是：LAS（用于JIS洗衣粉試驗的直鏈烷基苯磺酸鈉，WAKO Chemical Co.）、AS（用于生物化學(xué)的十二烷基硫酸鈉，WAKO Chemical Co.）、AES（乙醇乙氧基硫酸鹽，TAYCA Co.，EO:3）、AE8（乙醇乙氧基酯，EO:8，日本SHOKUBAI Co.）、AE12（乙醇乙氧基酯，EO:12，日本SHOKUBAI Co.）、LB （酒精EO/PO嵌段共聚物，EO:8，PO:3，朝日電器株式會社）和肥皂（用于洗衣的商業(yè)產(chǎn)品，標簽脂肪酸鈉純度：99%以上） 。這些表面活性劑的純度均基于產(chǎn)品文件或標簽。三種商用洗滌劑被命名為Det-1、Det-2和Det-3。Det-1為粉末型洗滌劑，表面活性劑成分為AES、AE和K-皂。Det-2也是粉末型洗滌劑，但主要由NaSOAP和K-皂組成，含有微量AE Det-3是一種液體型洗滌劑，含有AE和脂肪酸乙醇胺作為表面活性劑。

2.1.2、試驗用水

通過在1L蒸餾水中溶解26.1mg CaCl2＠2H2O、17.7mg MgSO4＠7H2O、1.1mg K2SO4和25mg NaHCO3制備標準試驗水。該試驗水作為CaCO3的水硬度為25ppm。為了測試水硬度成分對毒性試驗的影響，制備了另一種僅含有CaCl2＠2H2O的試驗水 紅色。該試驗水的水硬度為CaCO3，也為25 ppm。在本文中，前一試驗水命名為“4-鹽混合水”，后一試驗水命名為“CaCl2水”。

2.2、水生毒性試驗

2.2.1、野生稻

野生稻是在水族館商店購買的，在毒性試驗前，在100 L容量的容器中飼養(yǎng)7天以上，容器中充滿4-鹽混合水。水溫保持在20℃，明暗頻率保持在16小時/8小時的比例。喂食頻率為每天一次。

毒性試驗符合JIS K0102（1998）的要求 指南，其中規(guī)定了使用71種魚類對工業(yè)廢水進行水生毒性試驗的方法。將5 L試驗容器裝滿4-鹽混合水和試驗表面活性劑溶液。用小浸網(wǎng)捕獲10條魚，稱重、測量并轉(zhuǎn)移到5 L試驗容器中。測量試驗水的溶解氧和pH值 每天一次，在24、48、72和96小時后計算活的和死的個體數(shù)量。通過繪制96小時后的死亡率來確定半數(shù)致死濃度（LC50）。

2.2.2、大型水蚤

大型水蚤是在脫氯自來水中，水溫為18-22℃，以小球藻（小球藻工業(yè)公司V12）為飼料培育而成，用最近24小時內(nèi)出生的幼蟲進行毒性試驗。

毒性試驗符合JIS K0229（1992），“測定化學(xué)品對水蚤移動抑制的試驗方法” 。首先，將9.5 mL試驗水和試驗表面活性劑樣品倒入20 mL容量玻璃試管中。然后使用巴斯德移液管將5種試驗生物體轉(zhuǎn)移到試管中，并將蒸餾水添加到10 mL標記線中。在每種條件下使用4個試管樣品。通過固定化的圖形繪制確定EC50 24小時后，與表面活性劑濃度相對應(yīng)的反應(yīng)速率。

2.2.3、哈塔家族

在稻谷中捕獲足爪螨，并在實驗室用脫氯自來水在18-22℃的水溫下繁殖。使用四胺（Tetra Co.）作為飼料。選擇0.5-0.8 mm的生物體，使用0.5 mm網(wǎng)眼和0.8 mm網(wǎng)眼進行毒性試驗。

將50 mL試驗水和試驗表面活性劑樣品倒入50 mL燒杯中。使用巴斯德吸管將10個試驗生物體轉(zhuǎn)移到燒杯中。每種情況下使用2個試驗燒杯樣品。24小時后，通過使用400 mm CCD顯微鏡觀察內(nèi)臟運動來計數(shù)活的和死的個體數(shù)量 放大倍數(shù)：LC50通過死亡率的圖解法測定。

2.3、表面張力測量

EZ-Pi（基布朗公司）用于測量試驗液體的表面張力。該儀器是一種自動表面張力計，采用威廉平衡法，帶有鉑絲探針。液體溫度控制在20-22℃，測量前試驗液體靜置20分鐘以上。每種條件下重復(fù)測量6次打開，并使用平均值。

本文將表面活性劑溶液在急性水生毒性（LC50或EC50）出現(xiàn)點的表面張力值命名為“γtox”。

2.4、泥漿土添加量的評價

通過在表面活性劑溶液中加入泥土，研究了吸附劑存在對表面活性劑溶液表面張力或水毒性的影響。一般土壤樣品取自橫濱國家公園。大學(xué)校園。樣品通過1.0 mm篩孔，并在80℃下干燥2 h。使用玻璃管攪拌器將0.75 g土壤樣品與10 mL表面活性劑溶液在玻璃管中混合。靜置約30分鐘后，測量表面張力并進行毒性試驗。忽略了與大型水蚤一起倒出的微量標準水（<0.1 mL）。

表面活性劑的生物毒性以及水的硬度和吸附效應(yīng)對于水生生物毒性的影響——摘要、導(dǎo)言

表面活性劑的生物毒性以及水的硬度和吸附效應(yīng)對于水生生物毒性的影響——實驗

表面活性劑的生物毒性以及水的硬度和吸附效應(yīng)對于水生生物毒性的影響——結(jié)果和討論

表面活性劑的生物毒性以及水的硬度和吸附效應(yīng)對于水生生物毒性的影響——結(jié)論、致謝！